1

細(xì)胞老化

在原代細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，由于細(xì)胞老化而出現(xiàn)空泡的情況較為常見。原代細(xì)胞體外增殖能力有限，當(dāng)細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)，會(huì)因自發(fā)老化而產(chǎn)生空泡，甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡。同樣的，對(duì)于細(xì)胞系來說，隨著傳代次數(shù)的不斷增加，細(xì)胞也可能因老化而產(chǎn)生空泡。

2

更換培養(yǎng)基或血清或培養(yǎng)基理化性質(zhì)改變

更換細(xì)胞使用的培養(yǎng)基或血清，細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)不適應(yīng)的情況，導(dǎo)致空泡的產(chǎn)生；細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基，若因配制錯(cuò)誤、儲(chǔ)存不當(dāng)、過期仍使用或是血清質(zhì)量不過關(guān)等，均可能引發(fā)培養(yǎng)基的理化性質(zhì)如pH、滲透壓等發(fā)生改變，進(jìn)而影響細(xì)胞狀態(tài)，甚至導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)空泡。

3

細(xì)胞消化不當(dāng)

在處理如貼壁細(xì)胞等需要消化的細(xì)胞時(shí)，解離試劑的選擇、消化時(shí)間的控制、操作力度的把握等都至關(guān)重要。解離試劑選擇不當(dāng)，消化時(shí)間過長(zhǎng)或操作力度過大等均可能導(dǎo)致細(xì)胞受損，進(jìn)而引發(fā)細(xì)胞空泡的產(chǎn)生。

4

傳代或換液不及時(shí)

細(xì)胞長(zhǎng)滿后未及時(shí)傳代或細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間未換液，會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)過程中細(xì)胞代謝副產(chǎn)物的累積和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的耗盡，可能誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的發(fā)生，進(jìn)而細(xì)胞出現(xiàn)空泡化。

5

細(xì)胞污染

在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，若出現(xiàn)細(xì)菌、支原體、黑膠蟲等污染，將會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)明顯變差，并可能引發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生空泡等異?，F(xiàn)象。

6

細(xì)胞藥物處理

在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，研究人員可能會(huì)加入特定的藥物（如氯喹、氨基糖苷類抗生素、細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)劑等）對(duì)細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)處理。這些藥物通過影響細(xì)胞的代謝過程誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生特定的生物學(xué)變化，但也可能產(chǎn)生細(xì)胞毒性，進(jìn)而可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡甚至引發(fā)細(xì)胞死亡。

圖2. MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞經(jīng)過快遞運(yùn)輸刺激收貨時(shí)細(xì)胞狀態(tài)

圖3. MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞穩(wěn)定傳代后